Cell Biolabs：细胞收缩分析试剂盒

细胞收缩研究的小伙伴有福了，艾美捷代理的Cell Biolabs品牌提供两种不同的3D胶原细胞培养模型，帮助研究人员更加方便地对细胞的收缩能力进行体外分析，即两步法附着模型（two-step attached model）和漂浮基质收缩模型（floating matrix contraction model）。

备注：上述产品仅限用于科研学术研究用途，不得用于医疗与诊断。

常见问题解析：

Q1：细胞收缩试剂盒是否只适用于成纤维细胞样本？

A1：Cell Biolabs提供的两种不同的细胞收缩分析试剂盒都是基于胶原凝胶的细胞收缩试验，它不是细胞类型特异性试验。像成纤维细胞一样，适用于其他具有收缩能力的细胞，例如周细胞、平滑肌细胞和小梁网细胞等。

Q2：CBA-201中没有提供培养板，需要准备多大尺寸的培养板？

A2：CBA-201需要客户自备24孔细胞培养板，厂家实验室使用的24孔板顶部孔直径为16.26毫米，孔底部直径为15.62毫米，也可以使用其他尺寸的培养板，但是需要调整实验条件。（备注：CBA-5020&CBA-5021试剂盒中提供了抗粘附涂层的专用细胞收缩培养板）

Q3: 胶原蛋白聚合后需要加入液体培养基（CBA-201 step 4; CBA-5020 step 5），是加入试剂盒中提供的DMEM培养基，还是其他培养基？

A4：如果客户的细胞不适用DMEM培养，他们可以使用特定于自身细胞样本的培养基。

Q4: 胶原蛋白聚合失败是什么原因？

A4：pH是胶原蛋白聚合的关键因素：细胞收缩试剂盒中提供的胶原蛋白溶液是呈酸性的，在实验前必须中和掉。当5X DMEM添加到胶原蛋白溶液中时，它会变成黄色，因为它仍然是酸性的，但是一旦添加了中和溶液，pH应该是中性的，它应该变成粉红色。胶原蛋白只会在中性pH值下形成凝胶，因此在配制Collagen Gel Working Solution时使用校准的移液器非常重要。如果混合液仍然不是中性，可以考虑慢慢加入更多的中和溶液，直到溶液呈中性。这应该以 0.5-1.0?l 的增量缓慢进行，因为如果添加太多，pH会变成碱性，但很难根据颜色来判断。客户可以通过测pH值来确认是否是中性的。

如果经判断pH没有问题，那么建议客户尝试在Eppendorf管中进行小规模配制Collagen Gel Working Solution，看看是否能看到聚合反应：

Q5：释放胶原凝胶前是否需要彻底清除孔中的培养基？(cat#CBA-201)

A5：释放凝胶时无需去除培养基。 （备注：请注意，释放凝胶时，小心地将无菌刮刀插入孔壁和凝胶之间，然后沿着壁缓慢循环移动以完全释放整个凝胶。 轻轻摇动板，凝胶也应从孔底部释放。）

Q6：细胞培养两天后，需要在胶原基质释放前加入收缩介质，如BDM。但是说明书中没有显示加入BDM后需要培养多长时间？（cat#CBA-201）

A6：是否加收缩介质以及加入的收缩介质培养多长时间都是可选的，根据客户的需求客户也可以研究不同培养时间条件下的细胞收缩情况。（备注：客户应在释放凝胶之前添加收缩介质。 例如，如果他们想处理细胞2小时，需要在释放凝胶之前加收缩介质培养细胞2天。 但是需要注意的是，对于像2天这样的长时间孵育，客户应该对收缩介质在37°C下稳定多长时间有所了解。 如果收缩介质在2天内不稳定，会随着时间的推移而降解，则需要随时更换培养基。）